色譜創始于20世紀初,1906年俄羅斯植物學家TSWEET將碳酸鈣放入樹立的玻璃管中,從頂部倒入植物色素的石油醚浸出液,用石油醚清洗。管子的其他部分形成了色帶,被稱為色譜。管子里的填充物叫固定相,清洗劑叫移動相。隨著不斷發展,色譜不僅用于有色物質的分離,還常用于無色物質的分離。雖然“顏色”已經失去了意義,但色譜名稱至今仍在使用。
在20世紀30、40年代,薄層色譜和紙質色譜接連出現。20世紀50年代出現了“色譜”法,將“色譜”法提高到分離和“在線”分析的新水平,為現代“色譜”法奠定了基礎,1956年,Golly提出了“60年代引進了氣相色譜-光譜結合技術(GC-MS),有效地彌補了色譜定性特征差異的弱點。20世紀70年代有效氣相色譜儀法(HPLC)的興起,為揮發性、熱不穩定和高分子樣品分析提供了有力的手段。擴大了色譜的應用范圍,將色譜推進到了新的里程碑。80年代初出現了超臨界流體色譜(SFC)。兼具GC和HPLC的特點。20世紀80年代末突飛猛進的有效毛細管電泳方法(HPCE)更受關注,柱子效率高,理論塔數可達107M-1。生物大分子分離的方法
有獨特的優勢。色譜的簡單分類如下:色譜的分離原理主要是利用流動相和固定相之間物質分配系數的差異來分離?;旌衔镏袃煞N成分的分配系數不相同,流動輸送的速度不相同。車內移動是分離的。分離過程如左圖所示。如果將含有A、B兩組的樣品添加到色譜柱的頂部,A、B都會吸附在固定相上。然后用適當的流動沖洗,流動上游過時后,固定相吸附的兩組溶于流動相脫附,流動向前推進,已釋放的組分遇到新的吸附劑粒子,再次吸附。吸附柱上不斷吸附、解吸、再吸附、再解吸.如果過程兩種成分的理化性質有一些差異,在吸附劑表面的吸附能力也有一些細微的差異。反復多次,積累小差異,就會有大差異。結果顯示,吸附力弱,吸附力強。